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FAME全自動酶免分析對人ELISA試劑盒檢測系統因素分析
更新時間:2013-10-28   點擊次數:993次

        在全自動加樣儀的加樣高度設置中,不斷增加加樣高度,觀察FAME對4個質控血清平行孑L的檢測效果。加樣高度設置對檢測結果的影響:在AT plus 2容器參數編纂過程中,丈量酶標板的孔徑和高度,并進行加樣定位,確保12根一次性加樣針均在對應微孔的中心。因此,有必要對FAME洗液桶進行適當的水浴預溫,使洗液溫度達到18℃后再用于檢測,人ELISA試劑盒對保證FAME檢測結果的正確性起重要作用。但經進一步研究后發現,洗液在較低溫度下(小于14℃),FAME的洗板*減弱,陰性樣本的檢測曲線變寬,嚴峻脂血樣本可能會泛起假陽性。觀察檢測結果是否有假陰性及原始OD值的變異系數(CV)。在不同溫度的FAME洗液下,對88份正常的無償獻血者血樣進行4個項目檢測,觀察不同溫度的洗液對檢測結果的影響。樣本選用88份正常的*抗凝的無償獻血者血樣,為降低因試劑造成的誤差,4個項目在不同洗液溫度下的檢測均采用統一批號的試劑,于2周內完成。

        樣本抗凝方法對檢測結果的影響:將88份無償獻血者血樣隨機分為兩組,對照組和實驗組各44份,對照組血樣(m1)和肝素(u)的比例為1:10,實驗組血樣(m1)和肝素(U)的比例為1:2.室溫下,兩組血樣經3 000 r/min離心5 min后均有較好的分層,血漿呈液態,肉眼觀察兩組血樣無區別。近年來,良多采供血機構接踵引進了全自動酶免分析系統用于酶聯免疫吸附試驗(ELISA試劑盒)檢測,全自動酶免檢測設備在過程處理的速度、正確性精密度和重復性方面均優于手工操縱。分別在HBsAg、抗一HCV、抗一HIV和TP等4項ELISA檢測項目的酶標板上設空缺對照2孔、陰性對照3孔、陽性對照2孑L、質控1孔,其余88孔用于兩組血樣的檢測。方法隨機選擇對照組和實驗組各44份無償獻血者血樣,分別進行兩種不同方式的抗凝,應用FAME全自動酶免分析系統進行HBsAg、抗一HCV、抗一HIV、TP 4個項目檢測,比較兩組檢測結果。
        在嚴寒的冬季,當實驗室溫度低于14℃時,即使采取了升溫措施,使實驗室溫度很快達到預定的室溫,但洗液溫度的上升會存在嚴峻的滯后現象。洗液溫度對檢測結果的影響:用10℃蒸餾水對濃縮洗滌液進行20倍稀釋,充分混勻,待*溶解后加入FAME洗液桶,人ELISA試劑盒并用37℃水浴箱分別對其水浴加熱至14℃、18℃、22℃ 、26℃后用于檢測。探討3種常見的影響全自動酶免分析系統檢測結果的因素,進步ELISA試劑盒檢測結果的正確性。在加樣程序編纂中,加樣步驟及加樣體積按試劑仿單要求進行,加樣高度在軟件缺省值(8.1 mm)的基礎上分別增加0.5、1.0、1.5、2.0和2.5 mm。

            恰當的洗滌液溫度對保證FAME的洗板效果及檢測結果的重復性有重要意義。在無償獻血者標本中,經常會有較多的不同程度的脂血樣本,一般以為溶血、脂血樣本對ELISA 檢測結果影響不大L3 。若檢測結果為陽性,重新取樣后用相同試劑雙孔復測,人ELISA試劑盒若雙孔均為陰性,則確定原檢測結果為假陽性。檢測樣本用4個室內質控血清替換,各項試驗平行檢測2孔,對照用手工加樣,保證CUT OFF值計算正確。

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